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再读血培养

浪花一朵朵 淋床医学 2023-11-22


再读血培养

2022年3月2日,国家卫生健康委办公厅印发了《2022年国家医疗质量安全改进目标的通知(国卫办医函〔2022〕58号)》并随文印发了《2022年国家医疗质量安全改进目标》和《2022年各专业质控工作改进目标》。这也是国家卫健委继2021年首次发布国家医疗质量安全改进目标后的第二次。




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今天再次学习血培养:


1.送检指征:


(1)体温>38℃或<36℃

(2)寒战

(3)外周血WBC计数增多(>10.0×10^9/L,特别有“核左移”时)或减少(<4.0×10^9/L)

(4)呼吸频率>20次/min或PaCO2<32 mmHg

(5)心率>90次/min

(6)皮肤黏膜出血

(7)昏迷

(8)多器官功能障碍

(9)血压降低

(10)炎症反应指标升高,如CRP、PCT、真菌1-3-β-D葡聚糖检测(G试验)等。


2.采样时机:


(1)寒战或发热初起时采集,使用抗菌药物之前采血;

(2)当可疑临床症状出现后,应尽早采血培养;

(3)如果患者已经开始应用抗菌药物治疗,则应该在下一次用药前采血培养。


根据2017年国家卫生和计划生育委员会发布《临床微生物实验室血培养操作规范》(以下简称《操作规范》),对疑为成人血流感染的患者应尽可能在短时间内从不同部位采集2~3套血培养标本,此后2~5 d内不必重复采集。

在24 h内采集2~3套血培养标本,大部分的病原菌都可被检出。如怀疑感染性心内膜炎,宜在经验性用药前30 min内在不同部位采集2~3套血培养。

若24 h血培养阴性宜再加做2套血培养。

多套血培养结果可区别污染菌(尤其是凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属和草绿色链球菌),也可增加培养的阳性率。


3.采集方法:


(1)血培养宜单独采血,若需与其它检测项目同时采血时,应先接种血培养瓶,以避免污染。

采集过程中保持无菌观念,注意采集部位皮肤的消毒,消毒区域直径>3 cm。

常见消毒液有75%乙醇、2%碘酊,自然干燥60 s,1%碘伏需要作用1.5~2 min。

注意检查血培养瓶是否完好无损、是否过期。


(2)选择一个静脉穿刺点,采集需氧、厌氧各1瓶,瓶内使用聚茴香脑磺酸钠(SPS)作为抗凝剂(浓度为0.025%~0.05%),使用树脂作为抗生素吸附剂。

若采血量充足,注射器采集的血液应先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶,碟型针采集的血液反之。

若采血量不足则优先注入需氧瓶。


(3)成人血培养需氧瓶(儿童只需采取需氧瓶)、厌氧瓶各8~10 mL血;采血量每增加1 mL,阳性率增加3%(0.6%~4.7%)。

但采血量也并非越多越好,如使用肉汤培养基时,超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中和血中的抑制物质(补体、抗体、抗生素),应保持血液与肉汤的最佳比例1:4~1:10。


儿童中,厌氧瓶只有对特殊高危的患儿使用,母亲产褥期患腹膜炎,慢性口腔炎或鼻窦炎,蜂窝组织炎,有腹腔感染的症状和体症,咬伤,败血性,接受类固醇治疗的粒细胞缺乏患儿。


(4)仅在评估导管相关性血流感染(CRBSI)时采集导管血,即短期外周静脉导管置入、中心静脉导管置入和静脉输液港植入。如怀疑CRBSI或导管有细菌定植,短期外周导管应无菌操作拔除导管,中心静脉导管或静脉输液港如有必要也可拔除。剪切拔除导管尖端5 cm,采用Maki半定量培养,并抽取2套外周血培养。如需保留导管,则至少采集1套静脉外周血培养和1套导管血培养。


4.运送:


血培养瓶应在2 h内送至实验室孵育或上机,如不能及时送检,应将血培养瓶置于室温,不可冷藏或冷冻。

若培养瓶延迟送检而提示已有细菌生长,则应直接进行涂片镜检。

经评估后不合格的血培养瓶应拒收并尽快告知申请医师。


5.结果解读


(1)血流感染:

患者出现相关疾病的临床症状,如心内膜炎、脑膜炎、肺炎等,且2套培养瓶均为同一种微生物阳性,可判定为血流感染。


(2)可疑血流感染:

特定疾病如移植患者、腹部感染患者等,出现2套培养瓶为多种微生物的阳性结果;

患者出现相关疾病的临床症状,如留置导管后、修复心脏瓣膜、服用免疫抑制剂,且1套培养瓶出现阳性结果:如草绿色链球菌或凝固酶阴性葡萄球菌;

出现沙门菌、李斯特菌属、金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等阳性。


(3)可疑污染:

即使严格遵守无菌操作,仍有3%~5%的血培养瓶中出现痤疮丙酸菌属、梭菌、类白喉棒状杆菌、凝固酶阴性葡萄菌属等正常皮肤菌群,或不动杆菌属、芽孢杆菌等周围环境常见菌,仅1套培养瓶出现阳性结果。

但若不同部位血培养标本培养出以上同一种菌,或多次分离出同一种菌且药敏结果相同,则应考虑可能为致病菌。可疑血流感染和可疑污染,以及出现临床症状但血培养阴性,均需重复采血,必要时需做病毒病因学或非可培养的微生物检测。


6.考虑CRBSI时,是否拔除导管?


根据《操作规范》,


(1)如有1套及以上血培养阳性且导管尖端培养阳性,且菌种鉴定与药敏谱相同,则为CRBSI;

如2套血培养均为阳性,且菌种鉴定与药敏谱相同,在没有其它明确感染源的情况下,则为CRBSI;

如菌种鉴定但药敏暂未出,但导管血阳性报警时间比外周血阳性报警时间早≥120min,在没有其它明确感染源的情况下,提示为CRBSI;


(2)如仅血培养阳性,且阳性株为金黄色葡萄球菌或念珠菌属,则可能为CRBSI;

如需进行确认,需进一步采集其它部位外周血培养,若获得阳性且为同一菌种,在没有其它明确感染源的情况下,提示为CRBSI;


(3)如仅导管尖端培养阳性,则提示导管定植;


(4)如血培养和导管尖端培养均为阴性,则不考虑CRBSI。


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